Las proteínas argonauta AGO1 y AGO2 de Arabidopsis se unen específicamente a los pequeños RNAs derivados de un viroide nuclear (Abstract/Comunicazione in rivista)

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  • Las proteínas argonauta AGO1 y AGO2 de Arabidopsis se unen específicamente a los pequeños RNAs derivados de un viroide nuclear (Abstract/Comunicazione in rivista) (literal)
Anno
  • 2011-01-01T00:00:00+01:00 (literal)
Alternative label
  • Minoia S., Navarro B, Di Serio F, Flores R (2011)
    Las proteínas argonauta AGO1 y AGO2 de Arabidopsis se unen específicamente a los pequeños RNAs derivados de un viroide nuclear
    (literal)
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  • Minoia S., Navarro B, Di Serio F, Flores R (literal)
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Rivista
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Note
  • Comunicazione (literal)
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  • Minoia, S, Flores R.- Instituto de Biología Molecular y Celular de Plantas. (UPV-CSIC) Valencia, Spain (literal)
Titolo
  • Las proteínas argonauta AGO1 y AGO2 de Arabidopsis se unen específicamente a los pequeños RNAs derivados de un viroide nuclear (literal)
Abstract
  • La identificación y caracterización en plantas infectadas por viroides nucleares y cloroplásticos de pequeños RNAs viroidales (viroid-derived small RNAs, vd-sRNAs), similares a los micro RNAs (miRNAs) y a los pequeños RNAs interferentes (small interfering RNAs, siRNAs), es un firme indicio de la implicación del silenciamiento mediado por RNA en la defensa de sus huéspedes frente a estos agentes subvirales. Sin embargo, la cuestión de si los viroides, como los virus de RNA, son dianas no sólo de las RNasas Dicer-like (DCL) que generan los vdsRNAs sino también del complejo RISC (RNAinduced silencing complex), es controvertida. El componente esencial de las diferentes isoformas de RISC es uno de los múltiples miembros (hasta diez en Arabidopsis) de la familia Argonauta (AGO), que son cebados y guiados por pequeños RNAs (small RNAs, sRNAs) de origen endógeno o viral. Para investigar si las proteínas AGO también captan a los vd-sRNAs y, en tal caso, qué miembros de esta familia actúan así, hojas de Nicotiana benthamiana infectada por el viroide del tubérculo fusiforme de la patata (Potato spindle tuber viroid, PSTVd, la especie tipo de la familia Pospiviroidaecon replicación nuclear) se agroinfiltraron con plásmidos (amablemente proporcionados por el Dr. J.C. Carrington) que expresan las AGO1, AGO2 y AGO7 de Arabidopsis etiquetadas con un epitopo de la hemaglutinina. La inmunoprecipitación de extractos proteicos de los halos agroinfiltrados y su examen mediante análisis Western and Northern con sondas específicas mostró que: i) el nivel de expresión de las tres proteínas fue similar, ii) AGO1 y AGO2, pero no AGO7, captaron específicamente cantidades similares de los PSTVd-sRNAs de 21 y 22 nt, y iii) AGO7 captó específicamente el miRNA 390 por el que tiene gran afinidad, confirmando así la fiabilidad del sistema experimental empleado. Además de extender estos estudios a otros miembros de la familia AGO, queremos también examinar si la agroexpresión de AGO1 y AGO2 afecta al nivel del RNA genómico de PSTVd, así como emplear secuenciación masiva para diseccionar las propiedades estructurales de los PSTVd-sRNAs unidos a proteínas AGO. El hallazgo de que AGO2 capta vd-sRNAs con eficiencia similar a la de AGO1 es llamativo, porque recientemente se ha descrito para AGO2 un papel en la defensa antiviral. (literal)
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