Physical and functional interaction between the mini-chromosome maintenance-like DNA helicase and the single-stranded DNA binding protein from the crenarchaeon Sulfolobus solfataricus (Articolo in rivista)

Type
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  • Physical and functional interaction between the mini-chromosome maintenance-like DNA helicase and the single-stranded DNA binding protein from the crenarchaeon Sulfolobus solfataricus (Articolo in rivista) (literal)
Anno
  • 2002-01-01T00:00:00+01:00 (literal)
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  • Carpentieri F., De Felice M., De Falco M., Rossi M., Pisani F.M. (2002)
    Physical and functional interaction between the mini-chromosome maintenance-like DNA helicase and the single-stranded DNA binding protein from the crenarchaeon Sulfolobus solfataricus
    (literal)
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  • Carpentieri F., De Felice M., De Falco M., Rossi M., Pisani F.M. (literal)
Pagina inizio
  • 12118 (literal)
Pagina fine
  • 12127 (literal)
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  • 277 (literal)
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  • Le proteine “Mini-Chromosome Maintenance” (MCM) giocano un ruolo essenziale sia nella fase di inizio che in quella di allungamento della replicazione del DNA nella cellula eucariotica. Geni codificanti per proteine omologhe a MCM sono presenti anche nelle sequenze genomiche note di Archaea. In tale pubblicazione, noi abbiamo descritto la prima caratterizzazione biochimica della proteina omologa a MCM dal crenarchaeon termoacidofilo Sulfolobus solfataricus (SsoMCM). Analisi per gel filtrazione e ultracentrifugazione su gradiente di glicerolo indicano che SsoMCM forma esameri (470 kDa) in soluzione. SsoMCM ha attività NTPasica e DNA elicasica. La DNA elicasi agisce preferenzialmente su molecole di DNA a doppio filamento che hanno una coda alla estremità 5’ non appaiata ed è stimolata dalla “single-stranded DNA binding protein” di S. solfataricus (SsoSSB). Abbiamo inoltre dimostrato mediante metodi immunologici che SsoMCM e SsoSSB interagiscono fisicamente. Questi risultati forniscono la prima evidenza biochimica della interazione fisica/funzionale tra un complesso MCM ed un altro fattore di replicazione e suggeriscono che in vivo le due proteine possano prendere parte ad importanti vie metaboliche del DNA. (literal)
Note
  • ISI Web of Science (WOS) (literal)
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  • CNR (literal)
Titolo
  • Physical and functional interaction between the mini-chromosome maintenance-like DNA helicase and the single-stranded DNA binding protein from the crenarchaeon Sulfolobus solfataricus (literal)
Abstract
  • Mini-chromosome Maintenance (MCM) proteins play an essential role in both initiation and elongation phases of DNA replication in Eukarya. Genes encoding MCM homologs are present also in the genomic sequence of Archaea and the MCM-like protein from the euryarchaeon Methanobacterium thermoautotrophicum (Mth MCM) was shown to possess a robust ATP-dependent 3'-5' DNA helicase activity in vitro. Herein, we report the first biochemical characterization of a MCM homolog from a crenarchaeon, the thermoacidophile Sulfolobus solfataricus (Sso MCM). Gel filtration and glycerol gradient centrifugation experiments indicate that the Sso MCM forms single hexamers (470 kDa) in solution, whereas the Mth MCM assembles into double hexamers. The Sso MCM has NTPase and DNA helicase activity, which preferentially acts on DNA duplexes containing a 5'-tail and is stimulated by the single-stranded DNA binding protein from S. solfataricus (Sso SSB). In support of this functional interaction, we demonstrated by immunological methods that the Sso MCM and SSB form protein.protein complexes. These findings provide the first in vitro biochemical evidence of a physical/functional interaction between a MCM complex and another replication factor and suggest that the two proteins may function together in vivo in important DNA metabolic pathways. (literal)
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