Transgenically expressed T-Rep of tomato yellow leaf curl Sardinia virus acts as a trans-dominant-negative mutant, inhibiting viral transcription and replication (Articolo in rivista)

Type
Label
  • Transgenically expressed T-Rep of tomato yellow leaf curl Sardinia virus acts as a trans-dominant-negative mutant, inhibiting viral transcription and replication (Articolo in rivista) (literal)
Anno
  • 2001-01-01T00:00:00+01:00 (literal)
Http://www.cnr.it/ontology/cnr/pubblicazioni.owl#doi
  • 10.1128/JVI.75.22.10573-10581.2001 (literal)
Alternative label
  • Brunetti A., Tavazza R., Noris E., Lucioli A., Accotto G P., Tavazza M. (2001)
    Transgenically expressed T-Rep of tomato yellow leaf curl Sardinia virus acts as a trans-dominant-negative mutant, inhibiting viral transcription and replication
    in Journal of virology (Print)
    (literal)
Http://www.cnr.it/ontology/cnr/pubblicazioni.owl#autori
  • Brunetti A., Tavazza R., Noris E., Lucioli A., Accotto G P., Tavazza M. (literal)
Pagina inizio
  • 10573 (literal)
Pagina fine
  • 10581 (literal)
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  • TYLCSV è un geminivirus particolarmente dannoso per il pomodoro, diffuso in tutto il bacino del mediterraneo, contro il quale è attualmente possibile lottare solo con pratiche agronomiche. Per combattere il virus è stata intrapresa una strategia mediante piante transgeniche trasformate con un gene virale, con una delezione al C terminale. Studiando il meccanismo d'azione che induce resistenza al virus si è osservato che la resistenza mediata dall'espressione della proteina deleta (Rep210) è dovuta alla inibizione della trascrizione del gene virale Rep. Tale effetto non si osserva nei confronti di un virus differente (anche se con elevata omologia di sequenza), contro il quale le piante non risultano infatti resistenti. (literal)
Http://www.cnr.it/ontology/cnr/pubblicazioni.owl#numeroVolume
  • 75 (literal)
Rivista
Http://www.cnr.it/ontology/cnr/pubblicazioni.owl#descrizioneSinteticaDelProdotto
  • Precedentemente è stato dimostrato che l'espressione in pianta della proteina T-Rep del geminivirus TYLCSV, costituita dai primi 210 aminoacidi della proteina virale Rep, conferisce alla pianta caratteri di resistenza all'infezione del virus stesso. In questo lavoro vengono analizzati i meccanismi di tale resistenza, seguendo i cambiamenti nella trascrizione e replicazione virale a seguito di infezione con TYLCSV e con un altro ceppo del virus, il TYLCSV-ES[1]. Piante transgeniche esprimenti T-Rep, e protoplasti da esse derivati, erano resistenti a TYLCSV, ma suscettibili al ceppo TYLCSV-ES[1]. Nei protoplasti la replicazione del DNA era fortemente inibita solo nel caso di TYLCSV. Esperimenti (sui protoplasti transgenici) con il gene reporter GUS fuso ai promotori delle Rep dei due ceppi virali utilizzati hanno dimostrato una fortissima inibizione della trascrizione soltanto quando il promotore era derivato da TYLCSV. Un modello su come la proteina T-Rep interferisce con replicazione e trascrizione del DNA virale viene proposto. (literal)
Note
  • ISI Web of Science (WOS) (literal)
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  • BA, TR, LA, TM: ENEA, C. R. Casaccia, 00060 Rome, Italy. NE, AGP: Istituto di Virologia Vegetale, CNR, Torino, Italy (literal)
Titolo
  • Transgenically expressed T-Rep of tomato yellow leaf curl Sardinia virus acts as a trans-dominant-negative mutant, inhibiting viral transcription and replication (literal)
Abstract
  • We have previously shown that transgenic expression of a truncated C1 gene of Tomato yellow leaf curl Sardinia virus (TYLCSV), expressing the first 210 amino acids of the replication-associated protein (T-Rep) and potentially coexpressing the C4 protein, confers resistance to the homologous virus in Nicotiana benthamiana plants. In the present study we have investigated the role of T-Rep and C4 proteins in the resistance mechanism, analyzing changes in virus transcription and replication. Transgenic plants and protoplasts were challenged with TYLCSV and the related TYLCSV Murcia strain (TYLCSV-ES[1]). TYLCSV-resistant plants were susceptible to TYLCSV-ES[1]; moreover, TYLCSV but not TYLCSV-ES[1] replication was strongly inhibited in transgenic protoplasts as well as in wild-type (wt) protoplasts transiently expressing T-Rep but not the C4 protein. Viral circular single-stranded DNA (cssDNA) was usually undetectable in transgenically and transiently T-Rep-expressing protoplasts, while viral DNAs migrating more slowly than the cssDNA were observed. Biochemical studies showed that these DNAs were partial duplexes with the minus strand incomplete. Interestingly, similar viral DNA forms were also found at early stages of TYLCSV replication in wt N. benthamiana protoplasts. Transgenically expressed T-Rep repressed the transcription of the GUS reporter gene up to 300-fold when fused to the homologous (TYLCSV) but not to the heterologous (TYLCSV-ES[1]) C1 promoter. Similarly, transiently expressed T-Rep but not C4 protein strongly repressed GUS transcription when fused to the C1 promoter of TYLCSV. A model of T-Rep interference with TYLCSV transcription-replication is proposed. (literal)
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