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The human immunodeficiency virus antigen Nef forms protein bodies in leaves of transgenic tobacco when fused to zeolin (Articolo in rivista)
- Type
- Label
- The human immunodeficiency virus antigen Nef forms protein bodies in leaves of transgenic tobacco when fused to zeolin (Articolo in rivista) (literal)
- Anno
- 2008-01-01T00:00:00+01:00 (literal)
- Http://www.cnr.it/ontology/cnr/pubblicazioni.owl#doi
- 10.1093/jxb/ern143 (literal)
- Alternative label
De Virgilio M., De Marchis F., Bellucci M., Mainieri D., Rossi M., Benvenuto E., Arcioni S., Vitale A. (2008)
The human immunodeficiency virus antigen Nef forms protein bodies in leaves of transgenic tobacco when fused to zeolin
in Journal of experimental botany
(literal)
- Http://www.cnr.it/ontology/cnr/pubblicazioni.owl#autori
- De Virgilio M., De Marchis F., Bellucci M., Mainieri D., Rossi M., Benvenuto E., Arcioni S., Vitale A. (literal)
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- Pagina fine
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- I nostri esperimenti hanno fornito nuove informazioni sui meccanismi molecolari che portano alla formazione stabile di corpi proteici (protein bodies) nel reticolo endoplasmatico. La strategia da noi sviluppata può migliorare laccumulo di proteine che hanno naturalmente una emivita breve, e dunque ridurre gli eventuali costi di produzione di farmaci ricombinanti in piante transgeniche. Queste ricerche sono state svolte allinterno del progetto europeo Pharma-Planta (www.pharma-planta.org). (literal)
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- Rivista
- Http://www.cnr.it/ontology/cnr/pubblicazioni.owl#note
- Il fattore dimpatto JCR più recente di Journal of Experimental Botany è 3.630. E all11° posto nella classifica del settore Plant Sciences (7° posto se si escludono le riviste che pubblicano solo reviews). (literal)
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- Pubblicazione scientifica che descrive una strategia di ingegneria proteica e biologia cellulare per elevare la produzione di antigeni dinteresse medico in piante transgeniche. Lantigene usato è la proteina Nef del Virus dellAIDS (HIV virus). Laccumulo di Nef in foglie di piante di tabacco transgenico è stato elevato di più di 10 volte, rispetto a dati precedentemente pubblicati, mediante una fusione fra Nef e zeolina, una proteina chimerica da noi prodotta che forma corpi proteici stabili nel reticolo endoplasmatico. Zeolina è a sua volta una fusione fra faseolina di fagiolo e un frammento di zeina di mais (entrambe proteine di riserva dei semi). Fusioni fra Nef e il solo frammento di zeina sono invece instabili. E la prima pubblicazione scientifica in cui si mostra che una proteina chimerica contenente una proteina di origine non vegetale può formare corpi proteici stabili, simili a quelli che si trovano naturalmente nei semi di alcuni cereali. (literal)
- Note
- ISI Web of Science (WOS) (literal)
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- DVM, DM, RM, VA - Istituto di Biologia e Biotecnologia Agraria, Consiglio Nazionale delle Ricerche, via Bassini 15, 20133 Milano, Italy, European Union
DMF, BM, AS - Istituto di Genetica Vegetale, Consiglio Nazionale delle Ricerche, Articolazione Territoriale di Perugia, via della Madonna Alta 130, 06128 Perugia, Italy, European Union
BE - ENEA-BIOTEC Sezione Genetica e Genomica Vegetale, C.R. Casaccia, 00060 Roma, Italy, European Union (literal)
- Titolo
- The human immunodeficiency virus antigen Nef forms protein bodies in leaves of transgenic tobacco when fused to zeolin (literal)
- Abstract
- Protein bodies (PB) are stable oligomers naturally formed by certain seed storage proteins within the endoplasmic reticulum (ER). The human immunodeficiency virus negative factor (Nef) protein, a potential antigen for the development of an anti-viral vaccine, is highly unstable when introduced into the plant secretory pathway, probably because of folding defects in the ER environment. We have tried to promote the formation of Nef-containing protein bodies in tobacco (Nicotiana tabacum) leaves by fusing the Nef sequence to the N-terminal domains of the maize storage protein gamma-zein or to the chimeric protein zeolin (which efficiently forms protein bodies and is composed of the vacuolar storage protein phaseolin fused to the Nterminal domains of gamma-zein). Protein blots and pulse-chase indicate that fusions between Nef and the same gamma-zein domains present in zeolin are degraded by ER quality control. Coherently, a mutated zeolin, in which wild-type phaseolin was substituted with a defective version known to be degraded by ER quality control, is unstable in plant cells. Fusion of Nef to the entire zeolin sequence instead allows the formation of PB detectable by electron microscopy and subcellular fractionation, leading to zeolin-Nef accumulation higher than 1% of total soluble protein, consistently reproduced in independent transgenic plants. We conclude that zeolin, but not its gamma-zein portion, has a positive dominant effect over ER quality control degradation. These results provide insights into the requirements for PB formation and avoidance of quality control degradation, and indicate a strategy for enhancing foreign protein accumulation in plants. (literal)
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