DNA fragmentation in chicken spermatozoa during cryopreservation (Articolo in rivista)

Type
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  • DNA fragmentation in chicken spermatozoa during cryopreservation (Articolo in rivista) (literal)
Anno
  • 2011-01-01T00:00:00+01:00 (literal)
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  • Gliozzi T.M.; Zaniboni L.; Cerolini S. (2011)
    DNA fragmentation in chicken spermatozoa during cryopreservation
    in Theriogenology
    (literal)
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  • Gliozzi T.M.; Zaniboni L.; Cerolini S. (literal)
Pagina inizio
  • 1613 (literal)
Pagina fine
  • 1622 (literal)
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  • Si tratta del primo lavoro per la determinazione del danno al DNA in spermatozoi di gallo mediante comet assay. Nelle specie avicole e in particolare in gallo le ricerche relative alla valutazione del danno al DNA nel seme sono estremamente rare; inoltre negli avicoli non è ancora stata messa a punto una procedura di congelamento che assicuri buoni livelli di fertilità. Il metodo descritto può essere utilizzato nella valutazione multiparametrica del seme, sia allo scopo di indagare i meccanismi d’'azione dei vari fattori di stress coinvolti nelle tecniche riproduttive (es. refrigerazione e crioconservazione), sia per studiare opportune modifiche delle procedure. Inoltre può avere utilità nel monitoraggio della qualità del seme per l’'applicazione delle pratiche di congelamento in FA. (literal)
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  • 75 (literal)
Rivista
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  • La rivista su cui l'articolo è stato accettato è una quotata rivista scientifica internazionale di biologia della riproduzione animale. IF 2.073 (literal)
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  • Pubblicazione scientifica riguardante la valutazione degli effetti del congelamento in pellet su spermatozoi di una razza locale di gallo (Mericanel della Brianza). La procedura di congelamento impiegata ha determinato danni alle cellule spermatiche, riducendo la proporzione di cellule con membrana integra e la proporzione di cellule motili; si è inoltre osservato un incremento del danno al DNA, misurato mediante comet assay, sia in termini di proporzione di cellule con DNA frammentato che di proporzione di DNA nella coda delle comete. Tuttavia gli effetti del congelamento sull’integrità del DNA risultano di bassa entità rispetto al danno osservato a livello di membrana. In base ai risultati ottenuti le cellule spermatiche sembrano avere una bassa sensibilità alla frammentazione del DNA in seguito a congelamento in pellet. (literal)
Note
  • PubMe (literal)
  • Scopu (literal)
  • Google Scholar (literal)
  • ISI Web of Science (WOS) (literal)
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  • GTM - IBBA-CNR Milano; ZL, CS - VSA-UNIMI (literal)
Titolo
  • DNA fragmentation in chicken spermatozoa during cryopreservation (literal)
Abstract
  • Semen cryopreservation is fundamental both for the practice of artificial insemination, and for the conservation of genetic resources in cryobanks; nevertheless, there is still not an efficient standard freezing procedure assuring a steady and suitable level of fertility in fowl and consequently there is no systematic use of frozen semen in the poultry industry. This study examined changes in motility (CASA), cell membrane integrity (Ethidium Bromide (EtBr) exclusion procedure and stress test) and DNA fragmentation (neutral comet assay) in fowl spermatozoa before, during and after cryopreservation and storage at -196 °C. Besides an optimized comet assay for chicken semen was studied and applied to the analyses. Semen collected from 18 Mericanel della Brianza (local Italian breed) male chicken breeders was frozen in pellets and thawed in water bath at 60 °C. Measurements were performed on fresh semen soon after dilution, after equilibration with 6 % dimethylacetamide at 5 °C (processed semen) and after thawing. Sperm DNA damage occurred during cryopreservation of chicken semen and the proportion of spermatozoa with damaged DNA significantly increased from 6.2 % in fresh and 6.4 % in processed semen to 19.8 % in frozen-thawed semen. The proportion of DNA in the comet tail of damaged spermatozoa was also significantly affected by cryopreservation, with an increase found from fresh (26.3 %) to frozen-thawed (30.9 %) sperm, whereas processed semen (30.1 %) didn’t show significant differences. The proportion of total membrane damaged spermatozoa (EtBr exclusion procedure) did not increase by 4 °C equilibration time, and greatly and significantly increased by cryopreservation; the values recorded in fresh, processed and frozen semen were 2.9, 5.6, and 66.7 % respectively. As regards the proportion of damaged cells in the stress test, all values differed significantly (7.1 % fresh semen, 11.7 % processed semen, 63.7 % frozen semen). Total motility was not affected by equilibration (52.1 % fresh semen, 51.9 % processed semen), whereas it decreased significantly after cryopreservation (19.8 %). These results suggest a low sensitivity of frozen-thawed chicken spermatozoa to DNA fragmentation, therefore it should not be considered as a major cause of sperm injuries during cryopreservation. (literal)
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