Engineering a switchable toxin: the Potential Use of PDZ Domains in the Expression, Targeting and Activation of Modified Saporin Variants (Articolo in rivista)

Type
Label
  • Engineering a switchable toxin: the Potential Use of PDZ Domains in the Expression, Targeting and Activation of Modified Saporin Variants (Articolo in rivista) (literal)
Anno
  • 2010-01-01T00:00:00+01:00 (literal)
Alternative label
  • Giansanti F., Di Leandro L., Koutris I., Pitari G., Fabbrini M. S., Lombardi A., Flavell D. J., Flavell, S. U., Gianni S., Ippoliti R. (2010)
    Engineering a switchable toxin: the Potential Use of PDZ Domains in the Expression, Targeting and Activation of Modified Saporin Variants
    in Protein engineering (Print)
    (literal)
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  • Giansanti F., Di Leandro L., Koutris I., Pitari G., Fabbrini M. S., Lombardi A., Flavell D. J., Flavell, S. U., Gianni S., Ippoliti R. (literal)
Pagina inizio
  • 61 (literal)
Pagina fine
  • 68 (literal)
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  • Negli ultimi anni la tossina di pianta Saporina viene utilizzata per preparare chimere attive contro cellule tumorali, ma la sua elevata tossicità ha reso l’uso dei sistemi ricombinanti di espressione problematico . Con questo lavoro si dimostra che è possibile esprimere in grandi quantità una variante non attiva in E.coli ma che questa variante può essere successivamente attivata quando messa nel mezzo di incubazione delle cellule bersaglio. (literal)
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  • 23 (literal)
Rivista
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  • La rivista su cui l'articolo è stato pubblicato ha fattore d’impatto 2.787 (literal)
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  • pubblicazione scientifica riguardante l’espressione di varianti di Saporina, proteina inattivatrice dei ribosomi (RIP) di Saponaria officinalis, con domini estesi al C-terminale comprendenti domini di interazione PDZ (literal)
Note
  • ISI Web of Science (WOS) (literal)
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  • AL, MSF - IBBA-CNR, Milano; FG, LDL, IK, GP, RI - Università di L'Aquila; DJF, SUF –University of Southampton, UK; SG-Università Roma La Sapienza (literal)
Titolo
  • Engineering a switchable toxin: the Potential Use of PDZ Domains in the Expression, Targeting and Activation of Modified Saporin Variants (literal)
Abstract
  • In this paper we describe an engineered form of the ribosome inactivating protein saporin (sapVSAV), bearing a C-terminal extra sequence that is recognized and bound by PDZ2 domain from the mouse PTP-BL protein. The co-expression of sapVSAV and PDZ2 genes in E. coli BL21 cells, greatly enhances the production of the toxin in a soluble form. This increase was not due to protection from bacterial autointoxication due to the saporin enzymatic activity, but may arise from a stabilization effect of PDZ2 on the toxin molecule during biosynthesis of sapVSAV. We found that once purified, sapVSAV is stable but shows no toxicity to free ribosomes, while it is fully active against human cancer cells. Thus, our strategy of co-expression of a toxin moiety with a soluble PDZ domain may represent a new system to increase the yields in recombinant toxic proteins, allowing for the selection of new C-terminal sequences to target specific PDZ domains of mammalian intracellular domains. (literal)
Prodotto di
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